下面筆者談下藥廠設(shè)計之維生素C的生產(chǎn)工藝。維生素C最早是利用D-山梨醇作為原料,經(jīng)弱氧化酸桿菌一步發(fā)酵生成L-山梨糖,再經(jīng)化學(xué)合成法制備維生素C獲得成功。以后國內(nèi)外均沿用此法(通稱“萊氏法”)進行生產(chǎn)。在此方法中要用強氧化劑將L-山梨糖在4位的伯醇基氧化生成維生素C的重要前體2-酮基-L-古龍酸(簡稱2-KLG)。為了保護C6位的伯醇基不被氧化,就必須在硫酸存在下先用丙酮處理L-山梨糖,形成雙丙酮衍生物。氧化后還必須水解生成二異亞丙基衍生物,再經(jīng)轉(zhuǎn)化而得到維生素C。從20世紀(jì)60年代初期開始,中國和美國、法國、日本、德國等的科研工作者相繼進行了簡化和縮短萊氏法反應(yīng)路線的研究,重點都集中在微生物發(fā)酵,將D山梨醇或L-山梨糖作為原料直接轉(zhuǎn)化成2-酮基-L-古龍酸。70年代初,我國篩選得到一株以氧化葡萄糖酸桿菌為主要產(chǎn)酸菌、以條紋假單胞桿菌為伴生菌的自然組合菌株。單獨培養(yǎng)時,前者生長差且產(chǎn)酸微弱,而后者根本不產(chǎn)酸;而此組合菌株能將L-山梨糖繼續(xù)氧化生成維生素C前體2-酮基L古龍酸,最后經(jīng)化學(xué)轉(zhuǎn)化制備成維生素C。以后在生產(chǎn)實踐中采用上述產(chǎn)酸菌株氧化葡萄糖酸桿菌人為地與某種芽孢桿菌或其他的假單胞桿菌混合培養(yǎng),亦同樣可獲得高產(chǎn)量的2-酮基-L-古龍酸來制備維生素C.這一方法稱為二步發(fā)酵法。
由D-山梨醇制備L-山梨糖的一步發(fā)酵產(chǎn)生菌除了利用弱氧化醋酸桿菌外,利用生黑葡萄糖酸桿菌、惡臭醋酸桿菌、紋膜醋酸桿菌和擬膠桿菌也可進行這種氧化。L-山梨糖是進行維生素C生產(chǎn)的一種主要原料,由L山梨糖發(fā)酵制備2-酮基-L-古龍酸的微生物除上述的組合菌株外,熒光假單胞桿菌和雙黃假單胞桿菌也可產(chǎn)生少量的2-酮基-L古龍酸。