下面成都凈化工程公司就談下藥廠潔凈室設(shè)計之微生物測定。微生物測定的目的是確定浮游的生物微粒濃度和生物微粒沉降密度，以此來判斷潔凈室是否達到規(guī)定的潔凈度。因此微生物測定有測定浮游菌和測定沉降菌兩種方法。

細菌通常肉眼看不見，可將它們采集或沉降到培養(yǎng)基中培養(yǎng)。細菌培養(yǎng)時，由一個或幾個細菌繁殖而成的一細菌團稱為菌落形成單元數(shù)（CFU），亦稱菌落數(shù)。浮游菌用計數(shù)濃度表示（CFU或CFU/m3），沉降菌用沉降濃度表示［CFU/（皿·min）］。

由于我國用于檢測浮游菌濃度的儀器應(yīng)用還不普遍，許多企業(yè)還是采用沉降菌的測試方法，因此中國GMP2010版規(guī)定兩種方法可以并存，沉降菌和浮游菌可以同時測試，也可任選。浮游菌與沉降菌的關(guān)系存在著以下近似公式:

NgR＝NvFT

式中，N—在F面積上的細菌沉降數(shù)，CFU；

Ng—空氣中的浮游菌濃度，CFU/cm3；

V—含菌粒子沉降速度，cm/s；

F—沉降面積，cm2；

T—沉降時間，s。

?

（1）浮游菌的測定

浮游菌的測定可以參見國家標準GB/T16293—2010《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）浮游菌的測試方法》（以下簡稱《浮游菌測試方法》）。現(xiàn)把重點歸納如下。

①浮游菌測定是通過收集懸浮在空氣中的生物性微粒，通過專門的培養(yǎng)基，在適應(yīng)的生長條件下，讓其繁殖到可見的菌落進行計數(shù)，從而判定潔凈環(huán)境中單位體積空氣中菌落數(shù)的多少。

②浮游菌測定需有專門的采樣器、真空抽氣泵等設(shè)備，浮游菌采樣器常用撞擊法中的狹縫式采樣器。

③浮游菌采樣器必須要有流量計和定時器，并嚴格按儀器說明書的要求定期進行校驗和操作。

④浮游菌測定的采樣點及數(shù)目與懸浮粒子測定相同，即在同懸浮粒子測定時相同的測定點采樣。

⑤浮游菌潔凈度測定的最小采樣量和最少采樣點數(shù)目參見《浮游菌測試方法》的規(guī)定。

⑥浮游菌潔凈度的結(jié)果評定參見《浮游菌測試方法》的規(guī)定。

?

（2）沉降菌的測定

沉降菌是用暴露法收集降落在培養(yǎng)皿中的生物性微粒，然后加以培養(yǎng)、繁殖后加以計數(shù)得到的。沉降菌的測定可參見國家標準GB/T16294—2010《醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)中沉降菌的測試方法》（以下簡稱《沉降菌測試方法》），現(xiàn)把有關(guān)重點歸納如下。

①沉降菌測定的設(shè)備主要是90mm×150mm玻璃培養(yǎng)皿和各種培養(yǎng)基（常用普通肉湯瓊脂培養(yǎng)基）。

②沉降菌測定的培養(yǎng)皿應(yīng)布置在有代表性的地方和氣流擾動最小的地方。

在滿足最少測點數(shù)的同時，還要滿足最少培養(yǎng)皿數(shù)。不論面積大小，作為一個被測對象，都應(yīng)該滿足這個要求

③采樣方法及培養(yǎng)。將培養(yǎng)皿按要求放置后，打開平皿蓋，使培養(yǎng)基表面暴露30min后，將平皿蓋蓋上，然后在30～35℃的條件下（可用恒溫培養(yǎng)箱）培養(yǎng)48h后計數(shù)

④結(jié)果計算

M＝∑Mi/n

?

式中，M—平均菌落數(shù)，CFU；

Mi—1，2，3，…，n號平皿菌落數(shù)；

N—平皿總數(shù)。

?

（3）物體表面微生物測試

此測試的目的是確定物體（包括工作服）表面微生物污染的程度。一般有棉簽間接取樣后培養(yǎng)和直接接觸法取樣兩種測試方法。

接觸法使用羅達克（RODAC）培養(yǎng)皿（營養(yǎng)物瓊脂培養(yǎng)基），測試方法是將培養(yǎng)皿直接接觸需采樣的物體表面，培養(yǎng)后長出菌落。這個測試技術(shù)適用于平整光滑的表面，如桌面、地板、墻面等。

這項測試應(yīng)在去污染程序后進行。但瓊脂培養(yǎng)基留在物體表面上終究是個問題，因此，采樣后應(yīng)馬上進行去污染。每只培養(yǎng)皿需做好標志，指明采樣點的確切位置。應(yīng)注意房間里的標志供現(xiàn)在和將來參考。