一、藥廠設(shè)計(jì)之凝膠過濾層析
凝膠過濾是基于分子大小不同而進(jìn)行分離的一種層析技術(shù),一般情況下,均指液相柱層析。其通用的名稱還有凝膠滲透層析、分子篩層析、排阻層析等。
如果保證柱床高度、線性流速及原料濃度不變,凝膠過濾層析工藝可平穩(wěn)地由小量試驗(yàn)放大至中試及大生產(chǎn)規(guī)模。目前已有大至2500L柱床的凝膠過濾層析工藝應(yīng)用于大規(guī)模生產(chǎn)之中凝膠過濾層析的關(guān)鍵在介質(zhì)或填料的選擇上,應(yīng)從分離目的和需分離的物質(zhì)分子大小兩方面進(jìn)行綜合考慮。
為將原料中的目的組分按預(yù)期目標(biāo)分離出來,并達(dá)到要求的產(chǎn)量和分離效率,需要對(duì)分辨率、層析時(shí)間、進(jìn)料量等方面因素做綜合考慮,全面設(shè)計(jì)凝膠過濾工藝方法。要達(dá)到足夠的分辨率并不困難,設(shè)計(jì)重點(diǎn)可放在提高純化的效率方面,如怎樣獲得最大回收率,怎樣使收集的組分稀釋程度降至最低,還有如何使層析時(shí)間縮至最短等
二、藥廠設(shè)計(jì)之反相層析和疏水作用層析
反相層析和疏水作用層析都是基于物質(zhì)分子的疏水基團(tuán)與層析介質(zhì)上的疏水基團(tuán)相互作用在非極性的固定相和極性的流動(dòng)相之間重新分配而得以分離的技術(shù)。兩者的基本差別主要在于介質(zhì)功能基團(tuán)疏水性的強(qiáng)弱程度不同,反映在疏水側(cè)鏈的長(zhǎng)度及其在介質(zhì)骨架上的密集程度兩個(gè)方面。疏水性強(qiáng)的稱為反相層析,而較弱的則稱為疏水作用層析。
在疏水作用層析和反相層析中,當(dāng)不同疏水性的目的分子吸附到介質(zhì)上之后,主要通過降低鹽濃度或增加流動(dòng)相的極性來減少目的分子與介質(zhì)之間的疏水作用達(dá)到解吸和洗脫的目的。由于不同目的分子疏水性不同,因而與介質(zhì)之間的作用強(qiáng)度也就不同,因此在梯度洗脫時(shí)便可相互分離。